pBM19-T Simple 快速克隆試劑盒產(chǎn)品介紹
許多高溫DNA聚合酶,如Taq DNA聚合酶、Tth DNA聚合酶等擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物在3’-末端后都帶有一個(gè)突出的堿基A,這樣的PCR產(chǎn)物可以用3’-末端后帶有一個(gè)突出堿基T的載體方便地進(jìn)行克隆。pBM19-T Simple 快速克隆載體是為簡(jiǎn)化PCR產(chǎn)物的克隆而設(shè)計(jì)的。僅需短短5-15min即可完成連接實(shí)驗(yàn),當(dāng)天即可進(jìn)行轉(zhuǎn)化。該載體消除了原始載體上的多克隆位點(diǎn),克隆后的PCR產(chǎn)物將無(wú)法使用載體上的限制酶切下,需要在PCR擴(kuò)增引物上導(dǎo)入合適的酶切位點(diǎn)。此時(shí)如果使用PCR擴(kuò)增引物導(dǎo)入的酶切位點(diǎn)進(jìn)行DNA酶切時(shí),酶切反應(yīng)將不會(huì)受到T載體上其它多克隆位點(diǎn)影響,可以大大提高酶切效率,增加亞克隆成功率。可以用M13混合引物對(duì)陽(yáng)性克隆進(jìn)行鑒定,載體上具有M13通用引物結(jié)合位點(diǎn),可用于測(cè)序。
pBM19-T Simple 快速克隆試劑盒產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 易插入2kb以上大片段,而普通T載體則低效。
2. 重組連接僅需5-15分鐘,可當(dāng)日完成轉(zhuǎn)化。
3. 若PCR引物5’-末端加上1個(gè)“A”保護(hù)堿基,插入片段>50ng/uL時(shí),克隆率高達(dá)99%以上。
4. 此載體為博邁德公司采用自己的**技術(shù)制備的高速連接載體,具有連接效率高,白斑陽(yáng)性率高的特點(diǎn)。
5. 包含LacZ 基因,在含有IPTG,X-gal 的平板培養(yǎng)基上,可進(jìn)行藍(lán)白斑篩選。 pBM19-T Simple 快速克隆試劑盒
產(chǎn)品儲(chǔ)存
-20 ℃ 保存
測(cè)序用通用引物
M13F-47和M13R-48
pBM19-T Simple 快速克隆試劑盒pBM19-T Simple載體圖譜